如何才能正確的選擇與維護(hù)液相色譜柱
更新時(shí)間:2018-08-22 點(diǎn)擊次數(shù):1757次
液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器。那么如何才能正確的推薦色譜柱:
在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等,
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC,也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱
3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱或一些經(jīng)過修飾的C18柱,他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測或者選用HILIC色譜柱選擇強(qiáng)離子交換柱也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱
液相色譜柱基本構(gòu)造:柱管、壓帽/卡套、篩板、接頭 分析型;常規(guī)分析柱;窄徑柱;毛細(xì)管柱;制備型;半制備柱;制備柱;保護(hù)柱;保護(hù)柱套;保護(hù)柱芯。
液相色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護(hù)色譜柱。
1.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動。
2.經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。
3.選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞。
4.保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。
5.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?br />
6.一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。
7.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。
8.液相色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗。